Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。
了解ELISA試劑盒實(shí)驗步驟并不代表實(shí)驗就會順利進(jìn)行下去,還要了解的東西很多,為了降低問題的產(chǎn)生,接下來為大家講述一下ELISA試劑盒質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)是如何把控的。
1、嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
2、加樣后及時放人孵箱。標(biāo)本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。
3、封板溫育時,各孔一定要封嚴(yán),防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
4、用洗板機(jī)洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后好在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
5、合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。
6、加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
7、顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。
8、加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
9、應(yīng)保證C清潔,整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。